技术文献

棕榈酸PA(棕榈酸钠SP)诱导BEECs细胞凋亡、脂质堆积、线粒体功能障碍并增强自噬(IF=6.3)
棕榈酸PA(棕榈酸钠SP)诱导BEECs细胞凋亡、脂质堆积、线粒体功能障碍并增强自噬(IF=6.3)
过量PA刺激,导致了BEECs线粒体氧化应激和功能障碍,并增强自噬,从而引发了细胞凋亡。MT预处理降低了线粒体氧化应激,并通过AMPK-mTOR-Beclin-1途径进一步增强了受损线粒体的自噬清除,这共同减轻了PA诱导的线粒体功能障碍和BEECs的凋亡。本研究阐明了PA如何对BEECs产生损伤的机制,以及MT如何减轻PA诱导的BEECs损伤,这为预防NEB引起的生殖障碍提供了机制参考。
2024-10-29
CDD:高脂细胞添加剂-棕榈酸(PA)和油酸(OA)诱导小鼠原代肝细胞、HepG2细胞脂质沉积及脂毒性模型的经验分享
CDD:高脂细胞添加剂-棕榈酸(PA)和油酸(OA)诱导小鼠原代肝细胞、HepG2细胞脂质沉积及脂毒性模型的经验分享
在建立小鼠原代肝细胞、HepG2细胞脂质沉积和脂毒性模型中,上述实验条件和结果,可能会因加药时的细胞密度、代数、状态或耐药性的不同而有所区别。因此,建议具体实验中,先通过浓度、时间梯度实验,寻找出适合于所用细胞的最佳药物作用浓度和最佳作用时间。
2024-10-23
棕榈酸钠、油酸钠对原代肝细胞脂质沉积、氧化应激及AMPK信号通路相关基因表达影响的研究
棕榈酸钠、油酸钠对原代肝细胞脂质沉积、氧化应激及AMPK信号通路相关基因表达影响的研究
本研究详细阐述了油酸与棕榈酸最佳作用范围的摸索过程,最终通过油酸和棕榈酸浓度2∶1进行诱导原代骡鸭肝细胞使其产生脂质沉积,筛选出处理36h、油酸+棕榈酸浓度为1500μmol/L+750μmol/L的复合酸浓度组脂滴含量丰富且细胞活力80%以上,可以选取该条件来构建骡鸭原代肝细胞脂质沉积模型。本试验对构建成功的骡鸭原代肝细胞脂质沉积模型的氧化应激和超微结构检测显示,模型细胞表现出肝脏氧化应激,脂质过氧化产物,线粒体呼吸链功能缺陷,活性氧产生时出现线粒体功能障碍,β-氧化水平降低,脂肪生成增加,肝细胞内脂质堆积,产生活性氧和肝细胞损伤,而线粒体功能障碍是导致肥肝产生的关键因素,具有一定参考价值。
2024-10-12
棕榈酸(PA)诱导人肝癌细胞(HepG2)脂肪蓄积以建立细胞脂肪变性模型
棕榈酸(PA)诱导人肝癌细胞(HepG2)脂肪蓄积以建立细胞脂肪变性模型
本文以人肝癌细胞(HepG2细胞)为对象,采用棕榈酸高脂细胞添加剂(KC003,Xi'an Kunchuang Biotechnology, China)作为游离脂肪酸(free fatty acids,FFAs),完成体外细胞实验。采用可靠的高脂细胞添加剂,能够保证溶剂无毒、无菌、常温无析出、低温无析出、浓度精准,而且无需多次加热助溶,显著减少了操作步骤,提升了实验的稳定性。实际使用时,只需要将高脂细胞添加剂按照比例加入到完全培养基中即可。
2024-09-24
棕榈酸刺激模拟高糖高脂诱导心肌细胞(AC16)损伤模型
棕榈酸刺激模拟高糖高脂诱导心肌细胞(AC16)损伤模型
本文采用300μM棕榈酸钠、48h处理AC16心肌细胞系模拟肥胖患者体内高糖高脂环境,体外实验表明AC16心肌细胞在高糖高脂刺激后表现出细胞体积增大和ROS水平升高。此外,AC16心肌细胞在高糖高脂刺激后,Nrf2抗氧化途径(Nrf2、HO-1和NQO-1)的蛋白表达受到显著抑制。本研究为糖尿病心肌病的治疗提供了良好的细胞模型,具有参考价值。
2024-09-13
棕榈酸BSA高脂细胞添加剂诱导小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1)建立高脂细胞模型
棕榈酸BSA高脂细胞添加剂诱导小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1)建立高脂细胞模型
本文采用0.5mM棕榈酸(PA)处理MC3T3-E1细胞,模拟肥胖患者体内高脂环境,24h后,实验结果表明棕榈酸(PA)对MC3T3-E1细胞的增殖、分化和矿化有明显抑制作用,且能促进其凋亡。本研究为肥胖所致骨质疏松的治疗提供了一个很好的细胞模型,具有一定的参考价值。
2024-09-04
高脂细胞添加剂棕榈酸钠诱导小鼠C2C12成肌细胞衰老模型(细胞活力、脂质积累)
高脂细胞添加剂棕榈酸钠诱导小鼠C2C12成肌细胞衰老模型(细胞活力、脂质积累)
1)本文采用棕榈酸钠诱导的小鼠C2C12成肌细胞衰老模型,明确了最优浓度2.5μM下 ASP干预5天可以减缓衰老相关-β-半乳糖苷酶活性的增强、脂质的积累和P21、P16表达的增多,同时上调Klotho的表达。上述低浓度、长时间的细胞衰老诱导方案与常见的300-500μM、48-72小时损伤、炎症诱导方案不同,具有一定参考价值。 2)后期检测细胞活力(CCK-8或MTT)时,在高脂试剂和溶剂对照处理后,加入CCK-8或MTT前,需用PBS清洗2-3次,以去除溶剂对照和高脂试剂对吸光度的影响。
2024-08-11
肝细胞脂肪堆积模型、肝细胞脂滴、非酒精性脂肪肝细胞模型、肝脏脂肪变性细胞模型的建立步骤与方法
肝细胞脂肪堆积模型、肝细胞脂滴、非酒精性脂肪肝细胞模型、肝脏脂肪变性细胞模型的建立步骤与方法
在众多国内外研究中,NAFLD细胞模型的构建以添加游离脂肪酸(FFAs)最为常见。Gomez-Lechon发现,应用油酸钠、棕榈酸钠含量比为2:1的游离脂肪酸混合物刺激肝细胞,引起的细胞毒性和凋亡作用非常微弱,适用于诱导肝脏细胞脂肪变性。本研究中,应用油酸钠:棕榈酸钠为2:1,总浓度为1mmol/L的高脂培养基刺激Hepa1-6细胞24小时,成功建立了肝脏脂肪变性的细胞模型。 需要说明的是,2:1的游离脂肪酸混合物刺激肝细胞只是普遍做法,而不一定是最优做法,实际情况可以根据细胞类型调整游离脂肪酸的浓度、比例和作用时间。
2024-08-02
棕榈酸钠BSA高脂细胞添加剂诱导心肌细胞脂质沉积
棕榈酸钠BSA高脂细胞添加剂诱导心肌细胞脂质沉积
本研究选取出生1~3天的SD大鼠分离出原代心肌细胞后,与3T3-L1脂肪细胞构建NRCM/3T3-L1共培养体系,并加入400μmol/L棕榈酸(palmitic acid,PA)共培养2-3天,模拟肥胖时心肌细胞所处的内环境,成功诱导出心肌细胞脂质沉积和肥大表型。
2024-07-28
高脂细胞添加剂溶液不澄清、低温析出、常温浑浊、毒性太强以及50℃~60℃加热助溶等技术问题分析
高脂细胞添加剂溶液不澄清、低温析出、常温浑浊、毒性太强以及50℃~60℃加热助溶等技术问题分析
确保高脂细胞添加剂在低温、常温状态下均不产生浑浊、沉淀、析出或絮状物质,确保试剂稳定和浓度准确,确保试剂使用过程中,不需要加热助溶,不需要额外其他操作,可以直接加入到完全培养基中。加入到培养基后,晃动培养板,不存在漂浮状物或浑浊物。
2024-07-26
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