棕榈酸添加剂模拟高脂饮食诱导肝细胞脂质沉积和外泌体释放

非酒精性脂肪性肝病（non-alcoholic fatty liver disease，NAFLD）是指除外酒精和其他明确的肝损害因素所致的，以肝脏脂肪变性为主要特征的临床病理综合征，其疾病谱包括非酒精性脂肪肝（non-alcoholic fatty live，NAFL）也称单纯性脂肪肝、非酒精性脂肪性肝炎（non-alcoholic steatohepatitis，NASH）、脂肪性肝纤维化、肝硬化以及肝细胞癌。有创的肝脏组织活检是诊断NAFLD的金标准，寻找特异的血浆标志物用于NAFLD的早期诊断是一个研究热点。而外泌体有望成为NAFLD新的血浆标志物。最新研究发现，采用高脂饮食（HFD）和脂肪酸（FA）可以分别在动物水平和细胞水平增加肝细胞释放外泌体。

相关文献发表在Science Advances 2021上的文章（Lipid-induced DRAM recruits STOM to lysosomes and induces LMP to promote exosome release from hepatocytes in NAFLD），记录了以下详细内容：

采用即用型棕榈酸（PA）试剂处理HepG2细胞，发现0.3 mM PA处理24小时，显著增加了HepG2细胞中的脂滴形成和甘油三酯含量（图1）。同时，0.3 mM PA处理24小时，可显著增加HepG2细胞中DRAM的mRNA表达和外泌体释放（图2）。证明PA可以模拟高脂饮食，成功构建脂肪肝细胞模型，并促进肝细胞释放外泌体（图3）。

图1 棕榈酸（PA）诱导HepG2脂质堆积。A. HepG2细胞经0.3 mM棕榈酸或溶剂对照处理24小时后的油红O染色照片。B. HepG2细胞内甘油三酯含量测定。 

图2.高脂饮食（HFD）或脂肪酸（FA）通过上调DRAM表达，促进肝细胞释放外泌体。A和B. 小鼠肝组织中DRAM的mRNA表达；C-E. 小鼠血浆中外泌体水平；F. HepG2细胞经0.1 mM PA、0.3 mM PA或其溶剂对照（BSA）处理24小时后的DRAM的mRNA表达；G和H. HepG2细胞上清中的外泌体水平。 

图3. 高脂饮食（HFD）或脂肪酸（FA）促进肝细胞释放外泌体示意图。

小编总结：即用型棕榈酸（或棕榈酸钠）被广泛用于诱导心肌细胞、内皮细胞、胰岛细胞等多种细胞的脂代谢损伤模型，以模拟2型糖尿病、肥胖等疾病的病理生理过程。高脂油酸试剂盒（棕榈酸钠+油酸钠）主要用于诱导脂肪肝细胞模型。本研究采用即用型棕榈酸（PA）试剂诱导脂肪肝细胞模型，揭示了DRAM蛋白调控NAFLD进展过程中肝细胞外泌体释放的作用和机制，具有较高的创新性和重要性。但这种方法仍有改进空间，如采用高脂油酸试剂盒，可进一步提高肝细胞中甘油三酯含量和脂滴形成。