BSA偶联脂肪酸、钠/棕榈酸钠BSA溶液（PA水溶液、高脂细胞添加剂）诱导KGN卵巢颗粒细胞高脂环镜刺激模型
棕榈酸钠（PA，SYSJ-KJ001/KC001，Kunchuang biotechnology, Xian, China）在本研究中用于诱导卵巢颗粒细胞高脂环镜刺激模型，可采用的浓度为100-500uM，处理时间12-48小时。本研究采用300μM棕榈酸钠处理48小时，成功诱导了卵巢颗粒细胞高脂环镜刺激模型，细胞中也出现了明显的强氧化状态，具有较好的参考价值。
多囊卵巢综合征(PCOS)是导致女性不孕的常见病，占无排卵性不孕症的75%。肥胖、多毛症、闭经、不孕症困扰着许多年轻的PCOS患者。此外，患2型糖尿病、心血管疾病、非酒精性脂肪性肝病和子宫内膜癌的长期风险显著增加。多囊卵巢综合征的发病机制尚不清楚。研究报道，中枢性促性腺激素释放激素/促黄体生成素的高频分泌、肾上腺功能亢进和糖脂代谢紊乱的相互作用，在多囊卵巢综合征的发病机制中起着关键作用。
下丘脑神经激肽 B （NKB） 水平升高可能导致PCOS 的 LH 脉搏分泌过度活跃。然而，神经激肽B-神经激肽3受体（NKB-NK3R）系统在PCOS局部卵巢组织中的表达和作用尚未明确。
2023年3月，一篇发表在《American Journal of Reproductive Immunology》上的文章”The overexpression of neurokinin B–neurokinin 3 receptor system exerts direct effects on the ovary under PCOS-like conditions to interfere with mitochondrial function” ，作者将卵巢颗粒细胞系KGN细胞置于棕榈酸钠（PA）和二氢睾酮（DHT）环境中以模拟PCOS，阐明了NKB-NK3R通路在PCOS生殖内分泌疾病中的机制。
使用PA构建KGN高脂环镜刺激模型，具体步骤如下：
首先，作者采用100-500 μM范围内不同浓度的PA处理KGN细胞，维持12或48小时。结果发现， 在高脂环境刺激下，0-300uM浓度范围内，NKB和NK3R的基因转录水平逐渐增加，蛋白表达水平也逐渐增强；随后继续加大PA的刺激浓度，二者的转录与表达水平发生下调（图1）。
进一步采用PA 300uM浓度进行时间梯度检测，结果发现，在0-48小时内，NKB-NK3R的基因转录水平逐渐增加，蛋白浓度也逐渐增强（图2）。
可见PA模拟的高脂环镜刺激，呈浓度和时间依赖性地增加了KGN细胞中NKB-NK3R的表达。作者也通过氧化应激相关检测，证实了PA能够成功引起细胞中出现强氧化状态，伴线粒体膜电位下降和ATP产量降低，KGN高脂刺激模型成功建立（图3）。
总结与分享：棕榈酸钠（PA，SYSJ-KJ001/KC001，Kunchuang biotechnology, Xian, China）在本研究中用于诱导卵巢颗粒细胞高脂环镜刺激模型，可采用的浓度为100-500uM，处理时间12-48小时。本研究采用300μM棕榈酸钠处理48小时，成功诱导了卵巢颗粒细胞高脂环镜刺激模型，细胞中也出现了明显的强氧化状态，具有较好的参考价值。
